Анотація наукової статті про промислові біотехнології, автор наукової роботи – Г. Ермолева Ермолева
Була відзначена тенденція до пивоваріння бродіння бродіння пивного зсув. Розглядаються історія, принципи та переваги використання іммобілізованих (іммобілізованих) дріжджових клітин у пивоварні. Методи іммобілізації описані: адсорбція/адгезія, включення в гелі, ковалентне зв’язування, мембранна мікрокапсуляція. Зазначається, що іммобілізовані дріжджі можуть бути використані в переході до безперервних процесів, для отримання неалкохолічного пива, для бродіння злі з високим вмістом сухих речовин.
Подібні теми наукових творів з промислових біотехнологій, автор наукової роботи – Г. Ермолева Ермолева
Основні процеси заварювання. Отримання пива за допомогою іммобілізованих дріжджів
Інтенсифікація бродіння пива за допомогою електронно-іонної переробки (EI) пивних дріжджів
Здатність Saccharomyces cerevisiae дріжджів до іммобілізації на поверхні носія з метою прискорення пива
Основні процеси заварювання. Отримання пива за допомогою іммобілізованих дріжджів
Використання іммобілізованих дріжджових клітин для вироблення алкогольних напоїв
Я не можу знайти те, що вам потрібно? Спробуйте послугу вибору літератури.
Загальні процеси заварювання. Отримання пива із використанням іммобілізованих дріжджів
Позначена тенденція до пивоваріння для прискорення процесу бродіння пивного зсвіту. Розглянуті – це перші, принципи та переваги використання іммобілізованих клітин дріжджів у пивоварні. Описані методи іммобілізації: адсорбція/адгезія, в тому числі в гелях, ковалентному зв’язку, мамбранній мікро-капсуляції. Позначається, що іммобілізовані дріжджі холоду використовуються для зміни безперервних процесів для отримання безалкогольного пива, для бродіння з високим вмістом сухих суглобів.
Текст наукової роботи на тему «Основні процеси заварювання. Отримання пива за допомогою іммобілізованих дріжджів “
K; Основні процеси заварювання
Продовження. Для початку див. “Пиво та напої” 1997-2002.
Отримання пива за допомогою іммобілізованих дріжджів
Московський державний університет виробництва продовольства
Нині у пивоварстві знову виникає інтерес до зброджування пивного сусла іммобілізованими дріжджами. У світі почали діяти промислові установки. Ця публікація та наступні присвячені цьому питанню.
Пивоваріння – старий біотехнологічний та консервативний технологічний процес. Консерватизм виробництва можна пояснити прагненням отримання пива старовинних сортів з дотриманням традиційних технологічних прийомів. Але останніми роками широко почали впроваджуватися нові технології, що дозволяють інтенсифікувати виробничі процеси, й у першу чергу найтриваліші — бродіння і доброживания.
Традиційне головне бродіння, що у присутності всієї маси дріжджів, визначається сортом одержуваного пива. При бродінні і доб-раживании відбуваються складні біохімічні процеси, пов’язані з життєдіяльністю дріжджів, їх обміном речовин, і навіть з хімічними перетвореннями, які у пиві під впливом зовнішніх умов (температура, рН, концентрація різних органічних речовин). Процес бродіння відбувається під дією ферментів пивних дріжджів, що розщеплюють основну кількість вуглеводів сусла з утворенням етилового спирту, діоксиду вуглецю та продуктів конститутивного обміну. Що щільність початкового сусла (від 8 % до 23 % сухих речовин), то довше йде бродіння. За класичною технологією головне бродіння продовжується від 6 до 9-10 діб. Потім молоде пиво із вмістом етилового спирту залежно від сорту (0, 5-9 %) знімають із дріжджів і направляють на дображивание, тривалість якого може бути до 90 днів.
Тому протягом десятиліть пивовари прагнули скоротити найтривалішу частину технологічного процесу.
Тенденція до прискорення процесу бродіння призвела до розробки нових методів зброджування пивного сусла.
безперервних, періодичних в апаратах великої місткості – циліндро-конічних бродильних апаратах (ЦКБА), зброджування іммобілізованими (закріпленими) дріжджами. Вони ґрунтувалися на використанні підвищеної температури бродіння, збільшенні норми засівних дріжджів, застосуванні заходів щодо досягнення високої бродильної активності дріжджів.
Близько 100 років тому були спроби застосувати безперервне бродіння, а початку 70-х гг. – Використовувати іммобілізовані дріжджі в пивоварінні.
Вперше принцип іммобілізації мікроорганізмів було реалізовано у виробництві оцту більше 100 років тому, найбільшого розвитку дослідження та методи реалізації досягли у 70-80 роках. [5].
Адсорбовані дріжджові клітини для безперервного бродіння були випробувані 1899 Барбетом. У 50-60-ті роки. безперервне бродіння було предметом численних досліджень. Але в основному вони здійснювалися з інтактними (вільними) клітинами. Іммобілізація видавалася вирішенням усіх проблем. У 1971 р. Нарцис і Хелліх і в 1973 р. Бейкер і Кірсоп застосували, як перший крок до іммобілізації, суміш дріжджів та кізельгуру.
Практично одночасно стали проводитися дослідження щодо застосування іммобілізованих дріжджів для періодичного та безперервного бродіння.
Періодичне бродіння пива іммобілізованими клітинами досліджували А. П. Колпакчі та ін. на поліетиленовій плівці (1976 р.) та керамічних або поліетиленових кільцях (1980), на альгінатах Вайт і Портно (1978), гелі альгінату Парандова та ін. (1982), Шиндо та ін. (1990) на порист (1990) [4, 6].
Безперервне бродіння досліджували за допомогою дріжджів, іммобілізованих на ПВХ та пористих частинках (Кр’є, Наварро, 1976), діатоміті, ПВХ і пластмасі (Молл, 1977), альгінаті кальцію (Годфредсен та ін, 1981, 1981, 1981, 1981, 1981, 1981, 1981, 1981, 1981, Ліг. р).
Інтенсивний розвиток біотехнології в цей період був обумовлений створенням нового типу біокаталізаторів – іммобілізованих клітин мікроорганізмів. Мікроорганізми, прикріплені до основи, називають іммобілізованими (пов’язаними, пришитими, фіксованими, матрицьованими). Іммобілізованими вважаються клітини, які фізично пов’язані чи локалізовані у певному місці чи просторі зі збереженням їх каталітичної активності, якщо можливо чи необхідно, — їх життєздатністю, які можуть бути використані повторно або безперервно ^о^а та ін., 1987). Використання іммобілізованих дріжджів дозволяє легко керувати біокаталізом під час бродіння та конструювати біореактори типу щільно набитої колони, яка зручна для ведення процесу безперервним способом [3]. У цьому напрямі розвивалися і подальші дослідження (про результати яких будуть публікації надалі).
З технологічної точки зору іммобілізація клітин мікроорганізмів на твердому носії створює високоактивну поліферментну систему для отримання різноманітних продуктів, що є результатом метаболізму дріжджової клітини. Перевага іммобілізації – створення фактора мікросередовища, яке утворилося навколо частинок дріжджів за участю нерозчинного носія. Це мікросередовище містить гідрофобні заряджені частинки, що мають велике значення в концентруванні поживних речовин.
Іммобілізація на твердому носії змінює життєдіяльність мікробної клітини та інтенсивність біохімічних процесів мікроорганізмів. Багаторазове їх використання у біосинтезі різних речовин дає значний економічний ефект. У виробничих умовах витрата сировини для генерації біомаси знижується.
Використання іммобілізованих клітин дріжджів для інтенсифікації процесу обумовлено різними факторами: створюється клітинна маса в одиниці об’єму реактора, значно більша, ніж при періодичному та безперервному процесах з використанням інтактних клітин; у результаті значно збільшується вихід пива; подовжується термін дії ферментів клітини; прискорюється процес через кращі умови транспорту поживних речовин до клітини та пов’язаних з цим поліпшенням метаболізму. Застосування іммобілізованих систем зберігає і підтримує певний ритм росту дріжджових клітин та відповідності
ну швидкість розведення. Тому виключається необхідність видалення біомаси мікроорганізмів після кожного циклу. Дріжджі при іммобілізації активні та можуть зброджувати сусло протягом тривалого часу без втрати їх властивостей.
Як правило, при використанні іммобілізованих мікроорганізмів процеси росту та метаболізму мікроорганізмів поділяються. Це дозволяє підтримувати їхню високу здатність до перетворення субстратів. Застосування іммобілізованих дріжджів дає можливість керувати бродінням, ефективно використовуючи каталітичні властивості мікроорганізмів, а також створити умови для дії безперервних систем.
Перевагами використання іммобілізованих клітин у порівнянні з інтактними є:
підвищення продуктивності відділення бродіння та дображивания, поліпшення гідродинамічного режиму в бродильному апараті, менші площі під обладнанням та капітальні витрати;
можливість досягнення повного викидання цукру, поділу стадій розмноження дріжджів і бродіння і внаслідок цього зміни продуктів метаболізму дріжджів, досягнення накопичення побічних продуктів бродіння, що зумовлюють хороші органолептичні показники пива; можливість стабілізації якості продукції;
швидке та повне відділення збродженого субстрату від клітин мікроорганізмів, полегшення або повне виключення фільтрування;
досягнення підвищеної стійкості мікроорганізмів до несприятливого впливу підвищеної концентрації етанолу, кислотності субстрату, температури, важких металів; пролонгується дія клітин;
Через високу концентрацію біомаси потік процесів різко прискорюється, ефективність виробництва підвищується;
менш інтенсивне поширення дріжджів і, як наслідок, зменшення відходів;
менша кількість роботи у бродуванні та наборі, підготовці та вирощуванні дріжджів та пов’язаних з ними витрат на менший струм;
Можливість використання рас дріжджів (для створення бажаних або-ганолептичних характеристик), незалежно від їх зграї;
Можливість використання безперервної технології без витрат на очищення та виділення дріжджів, зменшення обсягу обладнання, можливості
Томатизація процесу бродіння, зменшення обсягу лікувальних робіт [1, 5].
Методи іммобілізації клітин.
Система з іммобілізованими мікроорганізмами складається з мікроорганізму, носія та їх зв’язку.
Вибираючи носій клітин, необхідно виходити з того, що він має максимально велику поверхню, виявляє високу механічну міцність і має тривалий період дії. Особливо важливо, щоб носій створював пористу структуру в об’ємі стовпця, яка сприяє вільному проходженню суслої і не перешкоджає швидкому видаленню вуглекислого газу з системи. Також слід враховувати наявність та ефективність перевізника.
З цього випливає, що ефективність використання іммобілізованих клітин залежить від типу носія.
Носиль впливає як на життєво важливу активність клітини, так і на сам процес, оскільки, рівномірно розподілений з точки зору субстрату, він сприяє рівномірному розподілу клітин, посилює метаболічні процеси та прискорює вивільнення вуглекислого газу, утвореного під час ферментації.
Мобільники поділяються на органічні полімерні носії та неорганічні. Їм подаються такі вимоги: вони повинні бути нерозчинними в реакційному середовищі, мають різні заряди з мікроорганізмом; мають високу гідрофільність, хімічну та біологічну стійкість до клітин у клітинах та дезінфікуючих засобах, не викликають неспецифічної адсорбції, мають механічну, теплову, хімічну та біологічну міцність, здатні регенерувати, легко гранульовані та активовані; мати розвинену поверхню, яка забезпечує максимальний контакт іммобілізованих клітин з субстратом; Бути нешкідливим, доступним, мати низьку вартість, можливість регенерації, силу утримання в умовах безперервного потоку.
Гаршеві для іммобілізації можуть мати зернисту структуру і виготовляти у вигляді волокон, плівок, вживання труб, мембран.
Вибір носія залежить від технологічного процесу, методу імтації та культури мікроорганізмів.
Методи іммобілізації можна розділити на механічні, фізичні та хімічні. Також використовується їх поєднання, наприклад, механічне утримання мікроорганізмів, посилене ковалентним зв’язуванням. Іммобілізація проводиться методами хіміорозорбії, іонами та електростатичним
ІМО сили, фулюляція та коагуляція, гідрофобні взаємодії, біоспекева адсорбція.
У бродуванні вони мають практичне значення:
Адсорбція/адгезія мікроорганізмів на поверхні інертних середовищ (дерев’яна стружка, пориста кераміка, кільця Рашига, скло, вугілля, туф, кераміка, рослинні волокна, силікатні мінерали, титанові сполуки, склопластики тощо);
Включення в гель (носій: кальцій-нату, желатин, карагенан, ага-рози, хітозан, пектин, поліакриламід тощо). Матриця-носій (ковалентні гелі, немісцеві гелі, іонотропні гелі) отримують під час ігор в легких умовах, щоб дозволити клітинам дріжджів інтегруватися в матрицю з найменшою втратою їх життєздатності;
Мембранна мікрокапсуляція мікроорганізмів (носій: волокно, діатоміт, двофазні емульсії, мембрани різного походження) [2, 4, 5].
Найбільший практичний інтерес викликає адсорбційний метод іммобілізації, в якому відбувається фізична взаємодія мікроорганізмів та медіа (сорбент). У той же час, процеси масової передачі добре протікають, нерівномірність лінійної швидкості потоку зменшується, поверхня контакту іммобілізованих клітин із субстрату збільшується. У зоні сорбенту спостерігається сорбція біологічно активних речовин – ферментів, вітамінів, амінокислот та інших стимуляторів росту мікроорганізмів, що допомагає активувати життєво важливу активність мікроорганізмів, а також концентрувати аутолізу дріжджів.
Розрізняють фізичну та хімічну адсорбцію. Фізично виникає з взаємним притяганням молекул-адсор-біви (адсорбованої речовини) та адсорбентом під впливом сил Ван-Дер. При фізичній адсорбції їх хімічна взаємодія не відбувається, а при хімічній адсорбції або хімірусорбції утворюються хімічні зв’язки між молекулами поглиненої речовини та адсорбентом через хімічну реакцію між ними.
За допомогою адсорбції можна виділити такі етапи: первинна адсорбція; вторинна адгезія, завдяки процесам утворення клітинних метаболітів (полісахаридів, білків тощо); Накопичення подальших шарів клітин на поверхні первинного клітинного шару за рахунок потоку мікроорганізмів у реактор під час безперервного
Входить до полімерних мереж (гелі)
Методи іммобілізації мікроорганізмів: k – іммобілізовані клітини [4]
процеси та (або) їх відтворення. Вторинна адгезія призводить до утворення механічно сильних шарів мікроорганізмів на поверхні сорбенту, що є основною причиною майже повної затримки клітин [3].
Адсорбенти мають велику специфічну поверхню, пов’язану з одиничною масою речовини. Вони можуть мати різні пори в діаметрі, які поділяються на макропори (більше 2’10-4 мм), перехідні пори (610-6-210-4) та мікропори (210-6 до 6’10-6 мм). Природа адсорбції також залежить від розміру порів: утворення шарів молекул поглиненої речовини в одній молекулі (мономолекулярна адсорбція) та товщина декількох молекул (полімолекулярна адсорбція).
Також тип сорбенту суттєво впливає на товщину, щільність клітинного шару та ступінь підтримки клітин. Використання сорбентів з шорсткою або пористою поверхнею дозволяє накопичити більшу кількість клітин на одиницю об’єму пристрою порівняно з сорбентами з гладкою поверхнею.
Адсорбція мікробних клітин залежить від їх видів, розміру, віку та хімічної природи
Поверхні клітинної стінки, що включає сполуки, які забезпечують її взаємодію з сорбентами – вміст білків та фосфатних груп безпосередньо залежить від гідрофобності клітини. Певна роль відіграє метаболіти, що секретуються клітиною, яка може змінити клейові властивості поверхні клітини.
Включення в гелі – це часто використовуваний метод іммобілізації, що характеризується достатньою силою фіксації клітин. Цей метод був використаний у ранніх дослідженнях іммобілізації. У той же час мікробна клітка лежить у полімерній сітці, в клітини яких проникають молекули субстрату. Перевага як носії надається природним біополімерам – полісахаридам з карбоксильною групою (альгінат, Каррагенан, Пектин) або з аміногрупою (хітозан).
Ці носії, завдяки своїй нетоксичності та сумісності з їжею та відносною дешевизною, мають переваги перед синтетичним поліакриламідом, полівініл-Рід, поліуретаном.
Гелі, отримані під час полімеризації, досить стійкі до механічних
Впливи інертні на хімічні реагенти, проникні для компонентів продуктів субстрату та клітинного метаболізму. Механічні властивості гелів залежать від структурних елементів, з яких вони утворюються. Наприклад, альгінат-сополімер манно-рона та гулюронові кислоти. Він складається з залишків D-манноронової кислоти, а сегменти ¿– гулюронової кислоти роблять її більш твердим, але крихким. У присутності двограну катіонів (наприклад, кальцій) альгінова кислота утворює пористий гель, ідеально підходить для колонізації клітинами. Розмір порів менший за розмір клітин, що запобігає їх вилуговуванню, але достатньо для отримання субстрату.
Методи вбудовування мікробних клітин у гелі підходять при використанні альгінатів та карагенанських матриць з розміром частинок гелю 0, 3-3 мм.
Для отримання іммобілізованих дріжджових клітин у гелі їх суспендзують у розчині альгінату натрію, розбризкують цю суспензію 1-4%розчином хлориду кальцію. Отримані гранули на поверхні мають нерозчинний шар альгінату кальцію, який має властивості напівпроникної мембрани. Розміри отриманих частинок різні і залежать від в’язкості розчину та швидкості обертання перфорованої розпилювальної пластини.
Механізм процесу захоплення клітин у цьому методі ще не встановлений остаточно, але вони припускають, що тут задіяні електронні та ковалентні зв’язки клітинної стінки. У сприятливих умовах можна тривалий час підтримувати життєздатність клітин, іммобілізованих цим методом.
Хоча частинки носія мають високе навантаження біомаси, втрата механічного зв’язування через стирання частинок обмежує промислове використання цього методу. Брифінг на основи альгінату кальцію з міжпростильними клітинами дріжджів показало, що обмеження перенесення поживних речовин призводить до зниження специфічної швидкості бродіння, утворення вищих спиртів та ефірів та поглинання амінокислот (Mazbeyekt, 1986) .
Хорошою альтернативою поліакрил-амідним гелям є Carragen, який має високу механічну міцність, і гідрогелі полівінілового спирту. Останні отримують шляхом заморожування концентрованих розчинів полівінілового спирту, що демонструє високу стійкість до хімічно агресивних розчинів, не єтоксичне та характеризується механічною міцністю.
Пивовари мало цікавлять метод включення в гелі, оскільки клітини дріжджів вимиваються з пори, гель нестабільний для стирання. Поперечні зв’язки в альгінатному гелі є перешкодою для суслості. В результаті високі концентрації вільного азоту амінокислот та діацетилів були виявлені в готовому пиві, що вказує на сповільнений розвиток дріжджових клітин.
У пивоварні було протестовано багато пілотних установ для іммобілізації клітин з використанням носія з альгінату кальцію (White and Portno, 1978; Nakaniski et al., 1985; Masschelein, 1986) [6]. Однак втрати механічної цілісності матриці обмеження масового посилання та регенерації потребують використання іншого середовища.
Мікрокапсуляція (інкапсуляція)-це метод, в якому гель аль-Гената покритий полікатичним полімером, наприклад, полізіном або поліетилену, що дає мембрану з іонними з’єднаннями. Тоді альгінат можна розчиняти в розчині цитрату. У той же час клітини залишатимуться в суспензії, але за полімерним бар’єром, який дозволяє передавати лише речовини з молекулярною масою 100 000.
Метод ковалентного зв’язування за допомогою полімерної субстрату повністю зв’язує дріжджі в гелі, що виключає промивання клітин. Порівняно з ним, метод адсорбції має перевагу в простоті іммобілізації, доступності, безпеки та дешевої носіїв.
Для технічного використання найбільше підходить три способи іммобілізації дріжджів: їх ув’язнення в матриці, адсорбція на поверхні середовища, поселення пористих матеріалів. Технологія іммобілізації накладає вимоги: висока здатність матеріалу, щоб більше дріжджів можна було іммобілізувати, і між суєтою та дріжджами не повинно бути перешкод.
Атоми та функціональні групи поверхонь реагують з клітинами дріжджів у носіїв та функціональними групами клітинної стінки, які мають певну активність заряду та поверхні, взаємодіють з носіями. Сила зв’язування дріжджових клітин з носіями характеризується кількістю енергії зв’язку: для ковалентного-300-400 кДж/моль, Іонік-160-460, водню-8-12, сольовий міст-4-6, Електростатична взаємодія-6, гідрофоб-4- 4- 8, 5, адсорбція- не більше 10 кДж/моль [5].
Здатність клітини до іммобілізації визначається температурою, склад
В екологічному середовищі. Як правило, клітини під час відставної фази та на першій стадії експоненціальної фази росту погано приводяться до АДОР. У середині експоненціальної фази для клітин максимальна здатність адсорбції є характерною, що не змінюється і не зменшується у стаціонарній фазі.
Ефективність процесу іммобілізації залежить від поверхневої енергії адсорбенту. Якщо він низький, то виникає адсорбція значної кількості клітин, які не утворюють міцних зв’язків з адсорбентом. Порівняно невелика кількість клітин фіксується на адсорбенті з високою поверхневою енергією, але міцність адсорбції висока.
Вільні клітини демонструють активність при рН 5, 0-5, 2, іммобілізованого 3, 6-7, 0, що дозволяє бродувати з нижчим рН та зменшити інфекцію процесу. Іммобілізовані клітини при 7, 40 ° С мають більшу ферментну активність, ніж вільні клітини, і більш ефективно концентровані ферми [4].
Фізіологія дріжджів. Останніми роками були розроблені технології та дизайн обладнання на бродінні або дозріванні пива з іммобілізованими дріжджами. Це дає можливість збільшити та оптимізувати видалення продукції з одиниці обсягу, зменшити поточні витрати та автоматизувати всі процеси.
Іммобілізовані клітини можуть використовуватися як періодично, так і постійно. Але для періодичного та постійного, необхідно провести подальші дослідження фізіології іммобілізованої клітини, масової операції, системи іммобілізації та структури реактора. Отримана інформація поєднає високу продуктивність та якість пива.
У системі з іммобілізованими дріжджами проводиться більша частина біомаси дріжджів.
Встановлено, що іммобілізація клітин дозволяє добре використовувати внутрішньоклітинні ферменти [3]. Активність деяких ферментів іммобілізованих клітин вища, ніж у інтактних клітин. Більше того, всі фази розвитку потоку дріжджів одночасно. З іммобілізацією мікроорганізмів, зміною проникності клітин, можливий більш рівномірний розподіл поживних речовин по всьому обсягу біореактора, що також позитивно впливає на життєво важливу активність мікроорганізмів. Було встановлено, що іммобілізовані дріжджі синтезують посилення концентрації ефірів.
Іммобілізовані дріжджі можуть використовуватися для періодичного або для безперервного процесу, тоді як для основного бродіння, так і для відновлення та дозрівання пива.
Особливий інтерес іммобілізовані дріжджі представляють з погляду переходу до безперервного бродіння з інтенсивним протоком сусла через апарат. При цьому, змінюючи параметри процесу, такі як швидкість потоку, температура, засів дріжджів і швидкість розведення, може бути досягнутий режим стійкого процесу. Крім того, безперервне бродіння іммобілізованими дріжджами надасть нові можливості генній інженерії пивоварних дріжджів.
Крім того, іммобілізовані дріжджі можна використовувати в біореакторах для отримання безалкогольного пива, для зброджування сусла з високою концентрацією сухих речовин. При цьому створення захисного шару навколо клітин сприяє покращенню властивостей дріжджів. Цей шар знижує етанольний стрес у мікросередовищі, оскільки полімери, що використовуються при іммобілізації клітин, допомагають транспортуванню етанолу всередину клітини і назад.
Значного прогресу в бродінні було досягнуто використанням іммобілізованих систем у пивоварінні. Застосування іммобілізованих дріжджів дозволяє переходити до безперервних схем, спрощувати операції з поділу дріжджів та пива, довгостроково експлуатувати метаболічні здібності клітин, підвищувати продуктивність процесу, отримувати нові сорти пива. Основний критерій придатності нової технології – кінцева якість готового пива: метод може бути застосований тільки в тому випадку, якщо якість пиво не змінюється або зміни незначні.
Я не можу знайти те, що вам потрібно? Спробуйте послугу вибору літератури.
1. Грачова І. М., Кривова А. Ю. Технологія ферментних препаратів – М.: Елевар, 2000. С. 512.
2. Колпакчі А. П. Вплив закріплення пивоварних дріжджів на носії на процес зброджування пивного сусла/Науково-технічна реферативна збірка. – М.: ЦНИИТЭИпи-щепром, 1979.
3. Калунянц К. А. Хімія солоду та пива. – М.: Аг-ропроміздат, 1990. С. 176.
4. Сарішвілі Н. Г., Рейтблат Б. Б. Мікробіологічні засади технології шампанізації вина. – М: Харчова промисловість, 2000. С. 364.
5. Хорунжина С. І. Біохімічні та фізико-хімічні основи технології солда та пива. – М.: Колос, 1999. С. 312.
6. Bardi E. P., Koutinas A. A., Soupioni M. J, Kandellaki M. E. Іммобілізація ялиці на вирівняному молекулярному матеріалі для низьких температур brewing. – J. Agric. Chem. 1996.